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轉基因 Cry1Ab/1Ac 試劑盒

規格型號:
轉基因 Cry1Ab/1Ac 試劑盒
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產品簡介:
轉基因 Cry1Ab/1Ac 試劑盒系用特異性抗 Cry1Ab/1Ac 單抗包被的微孔板和酶標記抗 Cry1Ab/1Ac 單抗,雙抗體夾心法檢測 Cry1Ab/1Ac 基因表達產物,可以高靈敏度和特異性的檢測轉基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。
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轉基因 Cry1Ab/1Ac 試劑盒 詳細介紹
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【原理】
    本品系用特異性抗 Cry1Ab/1Ac 單抗包被的微孔板和酶標記抗 Cry1Ab/1Ac 單抗,雙抗體夾心法檢測 Cry1Ab/1Ac 基因表達產物,可以高靈敏度和特異性的檢測轉基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。

 

【試劑盒組份(規格)】
預包被板(抗 Cry1Ab/1Ac 單抗)      12 孔×8
Cry1Ab/1Ac 酶標抗體                 12 ml×1 瓶
20×濃縮洗滌液                      30 ml×1 瓶
5×抽提液/稀釋緩沖液                30 ml×1 瓶
底物液 A                            7 ml×1 瓶
底物液 B                            7 ml×1 瓶
終止液                              7 ml×1 瓶
使用說明書                          1 份
0ppb 陰性對照                       1ml
4 個不同濃度的標樣:            
0.5 ppb 1.0 ppb 2.0 ppb 4.0 ppb          各 1ml

 

【試劑準備】
    試劑盒中的 20×濃縮洗滌液 30 ml 加 570 ml 滅菌 ddH2O 溶解稀釋至 1×洗滌液,5×抽提液(30 ml)加 120 ml ddH2O 稀釋至 1×抽提液,4℃存放備用。

 

【樣品準備】
    稱取約 20 mg 葉片,加 0.5 ml 1×抽提液(使用前 30 min 放置室溫)研磨至勻漿,室溫放置 30 min,測定前把樣品上清液稀釋 5-20 倍。
    測定莖干和胚乳中的 Bt 蛋白時,樣品稱取約 40 mg,加 1 ml 1×抽提液研磨。

 

【ELISA 反應】
1. 依次加 100 μl 陰性對照,標準品(4 個不同濃度的標樣:0.5 ppb,1.0 ppb,2.0 ppb, 4.0 ppb)和待測樣品至 96 孔板;
2. 用封口膜蓋住 96 孔板,快速搖動平板混勻樣品;
3. 37℃恒溫箱孵育 30 min;
4. 倒掉 96 孔板中液體,每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板,洗板 5 次,用吸水紙拍干;
5. 按順序在每個小孔中加入 100 μl Cry1Ab/1Ac 酶標抗體,然后重復步驟 2;
6. 37 ℃恒溫箱孵育 30 min;
7. 倒掉 96 孔板中液體,每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板,洗板 5 次,用吸水紙拍干;
8. 依次加入 50 μl 底物 A 液,50 μl 底物 B 液,重復步驟 2;
9. 室溫(20-25℃)避光孵育 10 min,加 50 μl 終止液,充分混勻終止反應,15min 以內在酶標儀上讀取結果。 在 450 nm 為主波長,630 nm 為次波長(或單波長 450 nm)下,用空白孔校零,再讀取各孔 OD 值。

 

【注意事項】
1. 測定中需使用的所有試劑和 96 孔板提前 30 min 放置室溫溫育(否則會影響試驗準確性),注意12 連管必須溫育后再從平板上取下,未使用完的預包被板條應置于有干燥劑的封口袋中密封保存;
2. 試劑使用前應充分搖勻;
3. 搖動平板混勻時注意避免樣品之間交叉污染;
4. 使用洗滌液漂洗時,洗滌液需要填滿每個小孔,進行充分漂洗;
5. 研磨好的樣品如果不能一次全部測量,可以暫時在 4 ℃避光保存,但是最好在 24 h 內測定;
6. 結果判讀請在反應終止后 15 min 內完成。

 

【Bt 蛋白濃度計算公式】

Bt 蛋白濃度(μg/g)=


 

【儲存條件及有效期】
試劑盒儲存于 2-8℃,切勿凍存;未開封試劑盒有效期 12 個月,開封后 3 個月內用完。(見包裝盒上標簽有效期)

 

【技術參數】
本品適用于玉米、棉花、大豆以及其各種農作物中轉基因成分的快速定量測試。

 

【產品編號】
規格:96孔
檢測樣本:種子
檢測時間:約2小時
有效期:12個月
儲存條件:2℃~8℃避光保存,切勿冷凍。

 

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